还原糖的测定--蓝—爱农(Lane—Eynon)法(菲林法)
糖分的还原性的测定方法叫还原糖法。
蓝—爱农(Lane—Eynon)法(菲林法)
比直接法的试剂中少亚铁氰化钾,终点为红色。
适于0.2%的还原糖含量。
斐林试剂甲液(CuSO4·5H2O)
斐林试剂乙液(酒石酸钾钠+NaOH)
甲、乙混合→酒石酸钾钠合铜
酒石酸钾钠合铜+葡萄糖 →葡萄糖酸 +Cu2O↓(红棕)
终点的确定:
葡萄糖+亚甲基蓝(氧化态)→亚甲基蓝(还原态)
过量 兰色 无色
(兰色消失)
终点时的颜色为:兰色消失了的红棕色
2、测定
①预测
准确吸取斐林试剂甲液5.00mL、乙液5.00mL→锥形瓶中,△至沸腾,再加入亚甲基蓝指示剂,在加热的条件下,用样液滴至蓝色褪尽。(先快后慢,要求很快达到终点,因为亚甲基蓝易被空气氧化为蓝色,且要求在加热的情况下以除去空气)
②测定
甲液5mL、乙液5mL→锥形瓶中,加入比上述预测量少0.5~1ml样液在2min内沸腾,维持沸腾2min,加入3滴亚甲基蓝指示剂,再在3min内滴定至蓝色褪尽。
3、计算
F
还原糖 % = --------------------- ×100
( V1/V )× m
m--样品质量,mg;V1--滴定量mL;V--样液总mL;
F--还原糖因素,10mL费林试剂,相当的还原糖量mg
F的求得有两种方法:
A、用标准还原糖液用上面同样方法标定10ml费林试剂求得。
B、查蓝—爱农法专用“还原糖因数表”附表
例 若V1=26 则F=49.9