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【“仪”起享奥运】火把花根片指纹图谱及化学成分研究中的色谱条件优化

小卡

2024/08/06

中药/天然药检测

采用ＰＤＡ对火把花根片样品溶液进行１９０～４００ｎｍ全波长扫描，发现多数成分在２６０ｎｍ下有最大吸收，该波长下色谱峰数量较多，响应较好，故选择２６０ｎｍ作为检测波长。
同时考察不同分离原理的色谱柱，包括ＷａｔｅｒｓＢＥＨＨＩＬＩＣ（２0１ｍｍ×１００ｍｍ，１0７μｍ）、ＷａｔｅｒｓＢＥＨＡｍｉｄｅ（２0１ｍｍ×１００ｍｍ，１0７μｍ）、ＷａｔｅｒｓＨＳＳＴ３（２0１ｍｍ×１００ｍｍ，１0７μｍ）、ＷａｔｅｒｓＣＯＲＴＥＣＳＴ３（２0１ｍｍ×１００ｍｍ，１0６μｍ）等色谱柱，结果发现火把花根片的成分在ＷａｔｅｒｓＢＥＨＨＩＬＩＣ和ＷａｔｅｒｓＢＥＨＡＭＩＤＥ色谱柱上不保留，而在ＷａｔｅｒｓＨＳＳＴ３和ＷａｔｅｒｓＣＯＲＴＥＣＳＴ３色谱柱上的分离良好，同时在ＷａｔｅｒｓＣＯＲＴＥＣＳＴ３色谱柱上的峰形更好，因此最终选择ＷａｔｅｒｓＣＯＲＴＥＣＳＴ３色谱柱进行后续分析。流动相考察了甲醇-水、甲醇-体积分数０.１％甲酸水溶液、乙腈-水和乙腈-体积分数０.１％甲酸水溶液４个系统，发现乙腈-体积分数０.１％甲酸水溶液的分离效果最好，峰宽较窄且对称性较好，最终将该系统作为流动相，并对洗脱梯度程序进行优化。但从色谱图中可以看出，在４２～４８ｍｉｎ间出现一明显“鼓包”，研究中尝试通过调整梯度程序将其进行分离，发现分离后并无明显色谱峰，推测“鼓包”中的成分虽然数量多但含量非常低，无法在指纹图谱中较好体现，综合考虑分离时间等因素后，最终未对其进一步分离，且该“鼓包”不参与相似度计算。

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