仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯
立即体验
APP内打开
回版面
1
收藏
点赞
拍砖
举报
取消
发布
当前位置:
仪器社区
>
药物检测
>
中药/天然药检测
>
帖子详情
【金秋计划】散寒化湿颗粒的抗病毒/抗炎作用机制
城头变幻大王骑
2024/09/10
私聊
中药/天然药检测
散寒化湿颗粒(
Sanhan Huashi Formula
,
SHHS
)是一种传统中药,是仝小林
院士开发的一种中药制剂,用于预防和治疗轻度至中度的
COVID-19
病例,在临床环境中对
COVID-19
显示出显著的治疗作用。然而,其具体机制和活性成分仍需进一步澄清,鉴定中药中的主要活性化合物,可以明确中药的作用机制,促进中药现代化建设。
通过体内和体外实验证明了
SHHS
的抗病毒和抗炎特性,随后通过
UHPLC-LTQ-Orbitrap-MS
解析了被吸收到血浆、肺和粪便中的
SHHS
成分,最后作者专注于五个关键的抗病毒靶点(
hACE2
、
RBD
、
3CL
pro
、
PL
pro
、
TMPRSS2
),阐明了
SHHS
化合物的抗病毒机制。此外,这些活性化合物的抗病毒和抗炎作用在细胞实验中得到了验证。
1
、
SHHS
降低病毒载量并减弱
Vero-E6
细胞的炎症反应,抑制小鼠病毒侵袭
作者首先检查了
SHHS
对
Vero-E6
细胞的细胞毒性和细胞活力影响,发现
SHHS
在浓度低于
3.17 mg/mL
时表现出最小的细胞毒性,且细胞活力保持在
85%
以上。接着,
作者检测了
SHHS
在细胞水平上对活
SARS-CoV-2
菌株的抗病毒作用
,发现
SHHS
显著降低感染细胞上清液中的病毒载量,且抑制
Vero-E6
细胞中
TNF-α
、
IL-6
、
CCL-2
等炎症和趋化因子表达。进一步
在
hACE2
小鼠中建立
SARS-CoV-2 VLP
呼吸道感染模型
,发现
SHHS
干预降低肺组织和细胞中
VLPs
水平,结果表明
SHHS
有效抑制了
SARS-CoV-2 VLPs
侵入小鼠肺组织
2
、
SHHS
缓解
SARS-CoV-2
攻击的
K18-hACE2
小鼠的肺部炎症
作者用
2019-nCoV WIV04
滴鼻液
处理
K18-hACE2
小鼠,随后给予
SHHS
。结果显示
SHHS
具有预防感染引起的体重减轻的倾向,且
SHHS
治疗后肺部炎症、肺纤维化
和出血得到缓解。
考虑到与
SARS-CoV-2
感染相关的肺部并发症的特征是促炎趋化因子和细胞因子的过度表达,
作者发现
SHHS
显著降低了几种趋化因子水平,突出了
SHHS
减轻
COVID-19
患者炎症反应的潜力
3
、
SHHS
改善
LPS
诱导的
ALI
模型小鼠和
RAW264.7
细胞的炎症损伤
为了评估
SHHS
的抗炎作用,作者构建了急性肺损伤(
ALI
)小鼠模型,发现
SHHS
可有效改善
ALI
小鼠的肺组织病理损伤,降低血清和肺组织样本中促炎因子水平。此外,体外实验对
RAW264.7
细胞施用
LPS
以模拟炎症环境,发现
SHHS
降低
RAW264.7
细胞上清液中
IL-1β
水平,
这些发现证实了
SHHS
在体内和体外的强效抗炎作用
4
、
SHHS
的成分解析
为了明确
SHHS
的化合物成分,采用
UHPLC-LTQ-Orbitrap-MS
技术对
SHHS
中的成分进行分析和鉴定。
初步筛选确定了
308
种化合物
,其中
224
种在正离子模式下检测到,
84
种在负离子模式下检测到,并进行了成分归属到单味药。此外,在正离子和
/
或负离子模式下检测并揭示了
SHHS
中被吸收到血浆、肺和粪便中的化合物
5
、
SHHS
治疗
COVID-19
的抗病毒机制研究
为了进一步研究
SHHS
的抗病毒机制,作者研究了
SHHS
的
80
种成分(释放到肺部、血浆和粪便中),并成功地从市场上
采购了其中的
28
种成分
。这些化合物主要来源于配方中的主要(君)和次要(臣)草药,包括血浆中存在的
16
种成分、肺中的
11
种成分和粪便中的
20
种成分。在结构上,这些化合物包括
3
种萜类化合物、
7
种香豆素、
6
种黄酮类化合物、
2
种木脂素、
2
种生物碱和
8
种其他类型的化合物,这些化合物结构类型基本上代表了
SHHS
中发现的化合物类型,是研究作用机制的代表性单体。
作者重点关注五个关键抗病毒靶点,
hACE2
、
RBD
、
3CL
pro
,
PL
pro
,
TMPRSS2
,研究上述
28
种单体化合物的抗病毒机制。
结果显示,没食子酸、印枳碱、芹菜素同时与
hACE2
和
RBD
结合,异紫花前胡内酯与
hACE2
结合,欧前胡素、白术内酯
I
、苍术酮、汉黄芩素、滨蒿内酯、异鼠
李素、没食子酸丙酯、香叶木素、槲皮素和木犀草素与RBD结合。
接下来,评估
28
种化合物对
SARS-CoV-2 3
CL
pro
, PL
pro
和
TMPRSS2
活性的抑制作用,发现没食子酸、紫花前胡苷、异紫花前胡内酯、表儿茶素和槲皮素可有效降低
3CL
pro
的酶活。异紫花前胡内酯、滨
蒿内酯和木犀
草素抑制
PL
pro
酶活
。滨蒿内酯、紫花前胡苷、异紫花前胡内酯抑制
TMPRSS2
酶活
。
尽管异紫花前胡内酯对多个靶标具有抑制作用,但由于其广谱活性,被归类为潜在的泛筛选干扰化合物(
PAINS
),因此被排除在随后的抗病毒测定之外(图
5a-5b
)。
6
、
SHHS
化合物在体外对
SARS-CoV-2
的抗病毒和抗炎活性
作者选择了五种化合物(没食子酸、芹菜素、苍术酮、槲皮素和紫花前胡苷)进行进一步抗病毒活性评估
。
没食子酸、芹菜素、苍术酮和槲皮素与
hACE2
或
SARS-CoV-2 RBD
共享一个结合表位,可直接减少
SARS-CoV-2 RBD
与
hACE2
的结合,从而发挥抗病毒活性。紫花前胡苷具有合适的
SARS-CoV-2 3CL
pro
抑制活性,表明有可能降低病毒的复制率。
作者通过用
WIV04
感染
Vero-E6
细胞,发现芹菜素和紫花前胡苷显著降低细胞上清液中的病毒载量,
其中紫花前胡苷抑制率最高,超过
66%
。此外,紫花前胡苷显著降低了
TNF-α
、
CCL-2
、
CCL-3
和
CXCL-10
的表达,显示出与
SHHS
相似的抗病毒表型(图
5c-5d
)。
7
、紫花前胡苷抑制
3CLpro
酶活的机制
最佳抗病毒活性的化合物紫花前胡苷通过抑制
3CLpro
酶活,发挥抗病毒功能。
作者使用氢氘交换质谱(
HDX-MS
)和分子对接研究了两种的相互作用。
HDX-MS
结果显示,紫花前胡苷导致肽
35-44
、
37-44
、
133-148
、
139-156
、
155-172
和
192-209
的分子量存在显著差异。分子对接结果,紫花前胡苷与
L141
、
N142
、
G143
和
Q192
形成氢键,并与
H41
、
M165
、
L167
和
P168
发生疏水作用,这些发现与
HDX-MS
结果吻合,在分子水平上提供了对紫花前胡苷作用机制的全面理解
总结
该研究通过体内和体外实验发现
SHHS
具有抑制病毒侵袭和增殖的能力,并具有显著的抗炎作用。紫花前胡苷(
Nodakenin
)是一种在
SHHS
中发现的化合物,通过抑制
3CL
pro
酶活性发挥抗病毒作用。研究结果为
SHHS
对抗
COVID-19
的机制提供了宝贵的见解,有助于更广泛地了解其治疗潜力。
相关话题
1
【金秋计划】鼠尾草酸直接结合并抑制ERAP1调节抗原加工和递呈
2
【金秋计划】水飞蓟宾靶向HDAC2调控组蛋白乙酰化改善非酒精性脂肪肝
3
【金秋计划】竹节香附素A靶向TDP43激活cGAS-STING通路增强抗肿瘤免疫
4
【金秋计划】地黄苷靶向结合并抑制RPL27A泛素化降解改善造血功能
5
【金秋计划】双氢青蒿素调节肠胶质细胞异质性以缓解结肠炎
+关注
私聊
xiahuanihao
第1楼
2024/09/12
分析了解散寒化湿颗粒。
0
发表回复
近期热榜
【官方邀请】高效液相色谱使用情况有奖调研
【中秋佳节】 在一起月更圆!
一个“不符合”难住新领导
第三届微课大赛投票进行中ing
热门活动
第三届微课大赛投票进行中ing
【仪采通】仪器采购更轻松
猜你喜欢
最新推荐
热门推荐
更多推荐
水浴蒸干需要注意什么?
讨论
2012/03/19
【讨论】汞溴红(红药水)中的汞对人体有没有什么不利影响?
2010/01/08
【金秋计划】天麻中镇静催眠的活性成分分析
分享
2024/09/10
用酚试剂测定空气中甲醛样品含量为1μg,采样体积为10L,采样时气温为20℃,大气压为0.973×105Pa,计算空气中甲醛的浓度
已应助
2023/02/15
药材丹参中丹参酮IIA的测定
第六届原创
2013/12/31
制剂中添加维生素E,有抗氧化的作用,原理是什么呢?
求助
2012/05/04
中药的主要化学成分与药理
分享
2012/02/21
体内药物分析
分享
2011/11/22
不同的参 有不同的妙用
原创
2024/09/19
中药颗粒剂的如何质量控制?
第十七届原创
2024/09/18
桃核承气汤激活Nrf2抑制铁死亡改善脓毒症所致心功能障碍
分享
2024/09/18
七叶苷激活Nrf2/GPX4通路抑制铁死亡治疗肝纤维化
分享
2024/09/18
白头翁皂苷B4衍生物靶向丙酮酸羧化酶改善结肠炎
分享
2024/09/18
当归中发现有效抗骨质疏松分子及化学全合成
分享
2024/09/18
青蒿素衍生物靶向脂质代谢关键蛋白诱导铁死亡
分享
2024/09/18
黄芪甲苷III靶向激活RXRa改善心力衰竭
分享
2024/09/18
【金秋计划】当没有合适的基质时可以用标准加入法来试试看
第十七届原创
2024/09/13
原子吸收火焰法测定土壤中六价铬所用质控样值一直在衰减
求助
2024/09/12
人比人真的该死!”-同是去参观实验室的两个人给带来的收获却是不同的!!
第十七届原创
2024/09/18
有经验的新进人员为什么就不能“拿来即用”哪?
第十七届原创
2024/09/18
检测报告出问题真正的法律责任应该由谁来负?
第十七届原创
2024/09/18
基线(随机出现)突跃有哪些原因?
求助
2024/09/12
关气瓶是先关总阀还是先关减压阀?
求助
2024/09/14
植物油中其他油的色谱检测初探
第十七届原创
2024/09/18
【金秋计划】+怎么做重水交换? ?
原创
2024/09/10
【金秋计划】+怎么在H谱中更好的显示活泼氢?
原创
2024/09/10
日本TOYO TSUSHO CX800N-24V东渡同轴继电器DPDT, 6 x N
分享
2024/09/10
【金秋计划】小檗碱靶向IRGM1抑制PI3K/AKT/mTOR通路缓解溃疡性结肠炎
分享
2024/09/10
欢迎Insp_9a4dbcdf担任液质联用(LCMS)实习版主
2024/09/10
作业指导书还搞个修改履历
讨论
2024/09/10
【金秋计划】肉桂醛靶向GRK2激活AMPK-PGC-1α 通路改善心力衰竭
分享
2024/09/10
信息化系统数据修改
已应助
2024/09/10
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器(上海)有限公司(PerkinElmer)
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁
举报帖子
执行举报
点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...