2. 分析样品顺序：以C18柱，流动相为单泵举例说明 正确安装柱子，确保不漏液（查柱压是否正常）→用甲醇-水（乙腈-水）系统冲洗柱子20min（比例根据流动相设定，比如流动相是磷酸盐缓冲液-甲醇（30：70），就设水-甲醇（30：70））→打开旁通阀，用100%的流动相快速（3ml/min)运行3min，使流动相迅速到达柱子端→关闭旁通阀，以0.8-1.2ml/min的流速走柱30min，柱温一般设到35度，检测器波长看具体要求，观察基线是否平直，柱压是否稳定→单针运行待分析的样品，保留时间设得长些，一般至少30min，看后面有没有小杂质峰→假如出峰良好，设序列进样，分析所有样品；假如不好，调节流动相比例自“打开旁通阀”重复上述步骤，直到满意为止→最后在offline里数据处理，一般设slope为1,width为0.04，积分时间可以锁定，baseline on valleys在基线漂移时非常有用。
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