yjm368
第7楼2012/08/30
现在实验室只有安捷伦1200的液相和紫外检测器。
我只要做出指纹图谱,不一定要质谱。下面是我想要做的样品制备,请帮我指点一下啊。
样品制备:
将新鲜浒苔样品用蒸馏水冲洗干净,至于烘箱中55℃干燥24h。干燥后的浒苔样品切断粉碎、过40目筛后混合均匀,制备成浒苔粉末样品。
准确称取0.5g浒苔粉末样品,置于100 ml具塞锥形瓶中,加入50ml正丁醇、乙醇混合液(V:V=9:1),在室温条件下超声提取60min,静置30min,过滤,取上清液于100ml旋蒸瓶中,在80℃条件下旋转蒸发至干,用乙腈溶解提取物并定容至2ml,过0.45μm微孔滤膜后作为供试品溶液。
流动相:水(A),乙腈(B)。
梯度洗脱
如何选流动相?或者1%磷酸水(A),乙腈(B)(?)
在做高效液相分析时,用流动相溶解样品是不是能适当地消除溶剂峰?
流速、检测波长、进样量、梯度洗脱程序、流动相比例等是如何确定的?
再有就是,单独用HPLC建立指纹图谱的时候是不是要选择好对照品,该如何选?是不是比如我要测定脂肪酸,那就选脂肪酸?