食品中苏丹红染料检测的固相萃取方法

逗点生物

2015/08/14

私聊

食品添加剂

食品中苏丹红染料检测的固相萃取方法

一、实验目的

本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法，HPLC法作为检测手段。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。

二、实验目标物

苏丹红Ⅰ(CAS:842-07-9),苏丹红Ⅱ（CAS:3118-97-6）,苏丹红Ⅲ（CAS:85-86-9），苏丹红Ⅳ（CAS:85-83-6）

三、应用范围

本方法适用于食品中苏丹红染料的HPLC检测及确证。

四、参考标准

推荐性国家标准《GB/T 19681-2005 食品中苏丹红染料的检测方法高效液相色谱法》

五、实验材料
ALN固相萃取柱3mL/500mg。
六、实验方法
1、样品提取
称取均质试样2.0ｇ试样（精确至0.001ｇ）于50mL离心管中，加入20ｍＬ正己烷，超声5min，过滤，用10mL正己烷洗涤残渣数次，至洗出液无色，合并正己烷液，用旋转蒸发仪浓缩至5mL以下。

2、SPE柱活化
向氧化铝柱小柱中加入6.0ｍＬ正己烷活化。
3、上样和洗脱

在柱中保持正己烷液面为2mm左右时上样，立即倒入上述待净化溶液，用正己烷少量多次淋洗浓缩瓶，一并注入层析柱，待样液完全流出后，视样品中含油杂质的多少用10-30ml正己烷洗柱，直至流出液无色，弃去全部正己烷淋洗液，用含5%丙酮的正己烷液60ml洗脱，并收集洗脱液。
4、重新溶解
50℃缓慢氮气流条件下吹至近干，用丙酮转移并定容至5ml，经0.45um有机滤膜过滤后上液相色谱仪测定。

5、HPLC条件
色谱柱：XR-ODS Ⅱ C18（2.0mm ×75mm×2.2μm）

流动相：A；B：丙酮=80:20] 梯度洗脱

表1 梯度洗脱条件

时间/min	B/%	A/%
0.00	25	75
1.50	25	75
4.00	100	0
8.00	100	0
8.01	25	75
13.00	Stop

流速：1mL/min
柱温：30℃
进样体积:10μl

七、实验结果

1、10ppb甜橙基质中苏丹红染料的添加回收结果
加标回收率均大于80%，RSD值小于5，符合标准要求。

表2 10ppb甜橙基质中苏丹红染料的添加回收结果

名称	1（%）	2（%）	3（%）	平均回收率（%）	RSD（%）
苏丹红Ⅰ	90.24	95.67	94.35	93.42	3.03
苏丹红Ⅱ	92.56	95.98	99.13	95.89	3.43
苏丹红Ⅲ	95.49	99.84	90.19	95.17	5.08
苏丹红Ⅳ	90.59	95.16	101.23	95.66	5.58