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【“仪”起享奥运】蛋白质检测:用于物种鉴定的肽标记物检测策略
小卡
2024/08/09
私聊
食品常规理化分析
对于含有多种哺乳动物和家禽物种的高度加工的肉类产品,使用质谱法(MS)检测特异性肽是一种强大的、高通量的肉类认证方法。猪肉特异性肽可以成为区分猪肉与牛肉、山羊肉和鸡肉的标志物。此外,使用串联质谱法(MS/MS)可以检测到牛肉中0.55%的猪肉和加工牛肉中0.24%的猪肉。牛肉和猪肉也可以在复杂和高度加工的食品系统中被量化,如肉酱。羊肉也可以用多反应监测(MRM)质谱法通过选定的肽标记物来识别,1%(
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)的猪肉、牛肉和马肉的添加量可以被区分出来。对鹿肉鉴定的特异性多肽检测相对来说进行得较少。鸡、鸭和火鸡是被广泛消费的家禽物种,可以通过基于物种特异性肽的分析方法进行鉴定。
用于物种鉴定的肽标记物检测策略是基于自下而上的蛋白质组学,其特点是对蛋白质中的特定肽键进行酶切。在蛋白质消化方法中,“在溶液中”是最经常使用的,因为其实验过程没有复杂的蛋白质分离操作。然而,样品的准备需要几个小时到一夜的时间:消化前的二硫苏糖醇(DTT)还原二硫键和碘乙酰胺(IAA)硫醇烷基化的步骤通常需要1.5~2.5 h;而消化的时间为4~24 h,典型的消化条件是过夜(12~18 h)。因此,由于样品制备步骤复杂,反应时间长,该方法在实际肉制品中的物种鉴定应用受到限制。
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