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【金秋计划】尿毒康合剂通过提高肠外泌体中MiR-146a水平抑制CKD大鼠微炎症
城头变幻大王骑
2024/09/03
私聊
中药/天然药检测
尿毒康合剂(NDK)
是一种以其降低
慢性肾病(CKD)
患者血清肌酸水平的能力而闻名的制剂,为
广东省中山市中医院院内制剂
。NDK由黄芪、茯苓、白术、大黄、川芎、红花、丹参、地榆组成。用于治疗CKD湿浊内留、气虚血瘀的本虚标实之证,具有祛湿浊、通肾络、益气健脾功效。临床研究表明,该方具有
增强肾功能、降低血
肌酐
、延缓ESRD发病
的作用。然而,NDK在
慢性肾脏
疾病中的作用和过程尚不清楚。
确定
microRNA-146a (miR-146a)
是否与CKD
微炎症
相关,以及NDK是否通过调节miR-146a/核因子κ b (NF-κB)信号通路来保护CKD微炎症。
(1)建立腺嘌呤诱导的大鼠慢性肾脏疾病模型。通过RT-
PCR
检测血浆和回肠
外泌体
中miR-146a的水平。(2)用脂多糖(LPS)刺激克隆的人结肠腺癌(Caco-2)细胞,并用
miR-146a模拟物和抑制剂转染
。随后,采用western blot和RT-
PCR
技术检测toll样受体4 (TLR4)、NF-κB和TNF受体相关因子6 (TRAF6)蛋白和mRNA的表达量。(3)采用酶联
免疫
吸附试验(ELISA)检测血清白细胞介素-1β (IL-1β)、白细胞介素-6 (IL-6)和肿瘤
坏死
因子α (TNF-α)的水平。(4)提取
血浆外泌体
,超高速离心提取肠组织外泌体。阴性染色电镜观察外泌体的形态及肠组
织和外泌体的超微结构。使用纳米颗粒跟踪分析测量外泌体的粒径。
CKD大鼠的病理特征包括全身性微炎症,这可能与肠组织外泌体的释放有关
。NDK抑制CKD大鼠Caco-2细胞的炎症反应,降低IL-1β、IL-6和TNF-α水平。调节炎症的miR-146a的表达在CKD大鼠血浆源性外泌体和肠源性外泌体之间存在差异,这可能是由于刺激回肠外泌体释放到血液中。
NDK能有效降低CKD大鼠回肠组织中TRAF6、NF-κB和TLR4的水平
。
NDK可以通过促进肠外泌体的释放,从而促进外泌体相关miR-146a的释放,抑制微炎症,从而有效改善CKD大鼠的微炎症
。
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