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【金秋计划】网络药理学和实验验证揭示了最佳配伍比的红芪-莪术抗结肠炎相关结直肠癌的作用机制
城头变幻大王骑
2024/09/05
私聊
中药/天然药检测
黄芪(AR)配莪术(V
PCR
)
源于《医学衷中参西录》,长期以来一直被用于治疗
胃肠道疾病
,尤其是
结肠炎相关的
结
直肠癌
(CAC)
。
红芪(HR)
与AR同属豆科,但不同属,在与V
PCR
配对治疗CAC时,传统上被用作AR的替代品。然而,
HR-V
PCR
抗CAC的最佳配合比和潜在的机制
尚不清楚。
采用
比较药效学、网络药理学和实验验证相结合的方法
,探讨HR-V
PCR
抗CAC的最佳配伍比及其作用机制。
采用
体重、结肠长度、
肿瘤
计数、生存率、疾病活动性指数(DAI)评分、H&E病理切片、炎症因子(IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α)、肿瘤标志物(K-Ras、p53)、肠通透性蛋白(clclauin -1、E-cadherin、mucin-2)
等指标评价不同配合比HR-V
PCR
对CAC的疗效。
综合上述指标,采用模糊物元分析法确定HR-V
PCR
与CAC的最佳配合比。通过
高效
液相色谱
(HPLC)
分析HR-V
PCR
的最佳配合比,利用TCMSP和文献对HR-V
PCR
的有效成分进行鉴定。采用Swiss Targets和GeneCards分别预测活性成分的靶标和CAC的靶标。然后通过Venn分析得到HR-V
PCR
抗CAC的共同靶点。
PPI网络
以STRING格式构建。
GO和KEGG富集
由David数据库可视化。最后,通过Western blot对预测的通路进行实验验证。
不同配合比的HR-V
PCR
均表现出不同程度的治疗效果,可改善CAC小鼠的体重、结肠长度、肿瘤计数、病理症状(DAI评分)、结肠及脏器指数、生存率,调节炎症因子(IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α)及肿瘤标志物(K-Ras、p53),下调肠通透性蛋白(cladin -1、E-cadherin、mucin-2)。
其中,通过模糊物元分析得出的
最佳配伍比为4:1
。精细筛选了30个HR-V
PCR
活性组分,靶向553个
特异性
基因。同时,确定了2022个与CAC相关的靶标。在生成维恩图后,确定了88个共同靶标。通过PPI网络分析,建立了29个核心靶点,其中AKT1排名最高。通过GO和KEGG富集进一步分析发现
PI3K-AKT信号通路
是潜在的机制。实验验证证实,HR-V
PCR
干预可有效逆转活化的PI3K-AKT信号通路。
结论
HR-V
PCR
药对缓解CAC的最佳配伍比为4:1。HR-V
PCR
通过减轻肠道炎症、改善肠道通透性、调节PI3K-AKT信号通路发挥作用
。
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