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【金秋计划】pH值微调,色谱分离大不同!
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2024/09/08
私聊
食品常规理化分析
pH值的微小调整就能让色谱分离效果天差地别?一起来看看pH值对酸性、碱性和中性化合物分离效果的影响。
【酸性化合物】
在较低pH值下,酸性化合物通常以分子形式存在,与色谱柱的非离子性固定相相互作用较弱,导致较快的移动速度和较短的保留时间。
【碱性化合物】
相反,在较高的pH值下,碱性化合物会离子化,与色谱柱的离子性固定相产生较强的相互作用,从而增加保留时间。
【中性化合物】
对于中性化合物,pH值的调整影响较小,但依然可以通过改变色谱柱的表面电荷状态来微调分离效果。
【pH值的精细调控】
精细调控pH值,可以实现对不同性质化合物的高效分离。例如,通过调整pH值至某个特定范围,可以优化酸性或碱性化合物的分离选择性。
根据流动相的pH值,我们可以将其分为酸性、碱性和中性流动相。以下是一些常见的例子:
【酸性流动相】
常见成分:通常含有酸性物质,如三氟乙酸,磷酸,甲酸,磷酸盐缓冲液(pH 2-7)、乙酸(pH 2-5)等。
适用情况:适合分离酸性或中性化合物,因为它们在酸性条件下不易离子化,有助于提高保留时间和选择性。
【碱性流动相】
常见成分:含有碱性物质,如氨水、氢氧化钠或三乙胺(pH 7-12)。
适用情况:适合分离酸性化合物,因为它们在碱性条件下会形成负离子,从而增加与色谱柱的相互作用。
【中性流动相】
常见成分:通常为水或含有中性缓冲剂,如磷酸盐缓冲液(pH 7左右)。
适用情况:适合分离中性或弱酸性/碱性化合物,因为它们在中性条件下的离子化程度较低,有助于保持色谱柱的稳定性。
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