求救：色谱峰峰形出现阶梯状，是何原因，请大家指教！

建议你还是把这个帖子转到液相色谱板块去求助！

　一、用有机相太小了，多少得10％

　二、用纯甲醇或纯乙腈冲柱一小时。看看是否有效果？

有可能是色谱柱污染了

我也觉得可能是柱子污染了，柱头的可能性更多。换上大比例的有机相冲洗

关注中，楼主问题解决了一定回来说声哈

有机相多的话后两个峰会分不开的，而且整体出峰时间太早了，以前都是这样做的，没有问题，是最近才出现的。

1、我用0.1 ml/min的流速 95%的甲醇冲了一夜，现在峰形好了，和以前的一样了，估计是做样品太多柱子脏了吧。
2、压力问题虽然有所好转，但还是走等度洗脱的时候会漂，而且每次进样压力都会跳动，如下图，请大家多提宝贵建议哈！

图1 甲醇：乙酸铵=5:95

柱头脏了或塌陷了.建议将柱子反过来用一下或用纯有机相反冲一下看看.

楼上的说的对，柱子脏了，多冲洗一下应该就好了