液相C18的新柱子

新柱的处理：每次新买的柱子虽然是经厂家测试过并密封好的，可是有的柱子到达手中时已经过很长的时间了，因此，每拿到一根新的色谱柱都必须要对柱子进行处理。首先，是配制好65%的乙腈/水，再把色谱柱正确的连接在色谱仪上，出口放空（注意：出口端切不可连上检测器，以免污染了检测器），以低流速0.1ml/min~0.5ml/min（如果是LC/MC 柱子，则应以0.3 ml/min 进行）均可，不可以高流速进行，等看见柱子出口有液体流出后，过20 分钟后再接上检测器，以循序渐进的方法将流速调至1.0ml/min（如果是LC/MC 柱子则应以0.3 ml/min 进行），继续冲洗2~8 小时。

新柱的使用：首先我们确认所分析样品流动相的PH 是不是在色谱柱PH 的耐受范围之内，以免损伤柱子!如果，确认在柱子的使用范围之内，就用做样品的流动相平衡柱子(如果流动相中含用缓冲盐溶液，在平衡柱子之前务必要先用5%甲醇或5%乙腈去过渡30 分钟以上。再用带盐的流动相去平衡色谱柱。)当色谱柱平衡了足够时间，基线非常平稳的时候，方可进样分析。不管是分析什么样的产品，由于各种各样的因素，样品中总有杂质。因此，最好在色谱柱前端加上保护柱。以增加色谱柱的使用寿命！

要求这么高啊，我们都是直接用1ml/min的甲醇直接冲过去的，也没有放空，也没有发现有什么影响！

我们的操作是：1.参照说明书上的操作方法
2.如果没有方法，则按照用纯的有机相如乙腈0.2ml/min的流速冲洗20到30个柱体积。如果急用，可以冲2小时后逐步提升流速至1.0ml/min，
3.安捷伦的工程师认为他们的色谱柱可以直接测定柱效后使用
柱效一定要做的，因为有些色谱柱的质量并不好，及时发现还能返厂处理。而且还能为以后对色谱柱的评估积累数据

我们用甲醇低流速过度到1.0的流速，一般也就一个小时左右，色谱柱最重的还是平时的维护，最好有预柱

我习惯是使用不含缓冲盐的水有机相配比平衡一段时间后，在慢慢切换成缓冲盐流动相。

呵呵，来的有点猛烈。不过三人行老师说的很对，最好还是低流速，先放空。预防为主嘛，出问题了就摊上大事了。

不过之前好像有听说，就算客户测出来柱效有问题，厂家也不怎么认可？毕竟出厂时是测试过了的。

对，仪器设备什么的，最重要的还是平时的保养。