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液相色谱峰分叉

  • Ins_b8537847
    2021/12/20
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 如图所示是标准品的色谱图。在相同的色谱条件下,以前跑出来的色谱峰峰型都特别好,分离度也好。现在目标峰出现了分叉现象,第一个有三个分叉的原本是两种物质,现在因为峰分叉分不开了。第二个是同一种物质的分叉。又跑了其他标准品测试,还是出现了分叉现象。但是峰重复性特别好。所以是什么原因呀,应该怎么解决,求各位大神解答。柱子是C18柱
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  • 初心

    第1楼2021/12/21

    应助达人

    估计是柱头污染,C18柱用90的乙腈冲洗2h,然后再用流动相平衡进样尝试,或者柱子倒用

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  • 叮叮当当

    第2楼2021/12/21

    应助达人

    裂峰或双峰首先会想到样品溶剂与流动相不匹配造成的,即溶剂效应,尽量让样品溶剂与初始流动相保持一致。样品体积过载过浓度过大造成的平头峰,采样点控制的不好也会裂峰。有干扰组分,没分开或样品提取方法不合适,即样品处理条件和色谱条件都不成熟,这就需要再优化。色谱柱问题,如筛板堵塞或空洞,分析时尽量都带着保护柱。

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  • myoldid

    第3楼2021/12/21

    应助达人

    1. 这现象重现不?如果只出现一次,可能就是上一针没跑完的,可以增大停止时间观察一下
    2. 重现就有多种可能。
    a. 溶剂效应,最好是用流动相来稀释样品
    b. 系统有死体积,重新安装柱子,特别是柱子入口部分,一定要接好
    c. 柱头有污染塌陷,更换柱子后试试
    d. 进样器污染,针座污染、进样针有毛刺、转子污染,超声清洗针座,转子密封垫,更换进样针
    e. 标品有降解,有污染
    f. 柱子或保护柱芯有污染,导致样品有吸附,分两次洗脱,出现分叉

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  • hnteng

    第4楼2021/12/21

    你这个不是所有的峰都分叉,可能是溶剂效应。

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  • Ins_b8537847

    第5楼2021/12/22

    我的样品溶剂和流动相是相同物质,分叉不是一次偶然,是重复性特别好,现在我把柱子反接用了,分叉现象没有了,所示会不会是柱头污染或者塌陷了,这种情况怎么处理呢

    叮叮当当(Insm_af467669) 发表:裂峰或双峰首先会想到样品溶剂与流动相不匹配造成的,即溶剂效应,尽量让样品溶剂与初始流动相保持一致。样品体积过载过浓度过大造成的平头峰,采样点控制的不好也会裂峰。有干扰组分,没分开或样品提取方法不合适,即样品处理条件和色谱条件都不成熟,这就需要再优化。色谱柱问题,如筛板堵塞或空洞,分析时尽量都带着保护柱。

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