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【金秋计划】细胞复苏后出现背景脏和小黑点的原因
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2024/09/07
私聊
食品常规理化分析
细胞复苏后出现背景脏和小黑点的现象是比较常见的,可能由多种原因引起。以下是一些常见原因及判断方法:
可能原因
细胞碎片:在细胞复苏过程中,一些细胞可能会经历凋亡或破裂,产生碎片。这些碎片在显微镜下可能呈现为小黑点。
血清沉淀:反复冻融的血清可能会产生沉淀,这些沉淀物也可能在显微镜下看到。
细菌污染:
细菌污染会导致培养基变浑浊,显微镜下可见快速移动的小黑点。
真菌污染:真菌污染通常会在显微镜下看到菌丝或其他形态的菌体。
支原体污染:支原体污染较难通过显微镜直接观察到,但可以通过
PCR
或荧光法检测。
判断方法
运动性:观察小黑点是否运动。布朗运动的小黑点通常是细胞碎片,而细菌会有更明显的活跃运动。
培养基浑浊度:细菌污染会导致培养基迅速变黄和浑浊,而细胞碎片不会。
接种平板:将怀疑污染物接种在微生物培养平板中,观察菌落形成情况。
显微镜观察:细胞碎片通常大小不规则,做布朗运动;而细菌污染的小黑点大小一致,快速移动。
预防措施
保持无菌操作:在操作前后用75%乙醇消毒所有工作表面。
减少血清冻融次数:尽量减少血清等试剂的冻融次数。
定期检测:定期使用
PCR
或荧光法检测支原体污染。
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