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【金秋计划】微生物实验中的CFU是什么意思?让你搞明白
王小盒
2024/09/04
私聊
食品常规理化分析
我们平时进行微生物实验时,菌落总数测定通常采用的是平板计数法,经过培养后数出平板上所长出的菌落个数,从而计算出每毫升或每克待检样品中培养出的菌落数量,通常以CFU/ml或CFU/g形式表示。
那么,大家了解CFU的计量单位吗?
(1)CFU的具体定义。
CFU就是在活菌培养计数时,由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落,指的是单位体积中的细菌、霉菌、酵母等微生物的群落总数。
CFU是形成菌落的菌落个数,不等于细菌个数。比如,两个相同的细菌靠得很近或贴在一起,那么经过培养这两个细菌将会形成一个菌落,此时就是2个细菌,1CFU。
(2)CFU的计数要求。
从理论来说,一个活细菌可以在条件适宜的固体表面上形成一个菌落,但是吸附于微小颗粒上的两个以上菌体或粘连在一起的菌团可能共同形成一个菌落,而且在不同环境因素的作用下,细菌的生活能力各不相同,会影响其在该条件下形成菌落的能力,导致形成的菌落数远低于实际的活菌数。
而在实际操作中,这种方式得出的数据并不能直接等同于样品中的微生物数量,只是一种认可的估算,这就要求我们在进行平板涂布或者接种之前把微生物活菌进行充分且均匀地分散。但是,一些链球菌、球菌等天生就不能分散均匀。此外,考虑到各类样品的微生物含量不一,为了使CFU区间按照国标计算方法有效落在30-300之间,必须要保证合理的稀释倍数,过多或者过少都不合适。
(3)CFU的估算方法。
使用菌落形成单位进行计数与一般的计数方式不同,一般会将死菌和活菌都进行计数,但是,CFU计数只有是活菌才能在平板上生长形成菌落,因此,只计算活菌数量。理论上只要分散足够均匀,一个活细胞就代表一个CFU。
同时,微生物最终能否在平板上生长成一个菌落,还是和培养基、培养条件和微生物状态等诸多因素有关。这就代表了CFU并不是一种精确的计数方式。
总之,CFU只是一种估算方法,选择CFU进行计量表示时,就需要接受这种测量方式的误差。比如,如果实验是定量菌种的数量标示的是“CFU”,代表是用培养基法来计数得到的;如果定量菌种是用流式细胞仪等其他方式进行计数,那么,标示用“个”则更为合理,这点是大家需要注意的。
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