仪器信息网APP

选仪器、听讲座、看资讯

立即体验

当前位置：仪器社区 >药物检测 > 中药/天然药检测 > 帖子详情

甘草酸靶向调控AKR7A2抑制氧化应激改善肝纤维化

小卡

2024/09/09

中药/天然药检测

肝纤维化是指持续性肝损伤后，肝内结缔组织异常增生进行自我修复而引起的可逆性病理现象，且在严重情况下可发展成肝硬化和肝癌。肝纤维化的发病机制复杂，其中细胞外基质沉积和慢性肝损伤导致的肝星状细胞（HSC）持续活化是主要的发展进程。目前仍然没有确定的药物可以用于逆转肝纤维化并在临床中发挥肝保护作用。甘草酸被报道具有肝脏解毒、抗炎、抗氧化和抗病毒活性，但甘草酸在CCl₄诱导的肝纤维化模型的靶蛋白尚未被确定。中国中医科学院西苑医院王培利联合中国中医科学院中药研究所青蒿素研究中心的王继刚等团队在Phytomedicine（中科院1区，IF=6.7）发表题为“Glycyrrhizic acid ameliorates hepatic fibrosis byinhibiting oxidative stress via AKR7A2”的文章，发现甘草酸可通过AKR7A2抑制活化HSC中ROS介导的氧化应激，可显著逆转肝纤维化。
在该研究，与模型组比较，血生化和病理切片结果均显示甘草酸组可改善四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化。体外实验表明，甘草酸对正常肝细胞没有影响，但对肝癌细胞HepG 2和肝星状细胞LX-2都有抑制作用，且流式细胞术表明甘草酸可清除LX-2细胞内活性氧，维持活化HSC的稳态。接下来作者用基于活性的蛋白质组分析(ABPP)鉴定LX-2细胞中甘草酸的蛋白质靶标（图1）。凝胶扫描图的结果显示甘草酸（GA）减弱了IAA-yne探针的荧光信号，表明GA与IAA-yne标记的蛋白质竞争性结合（图1B）。对各组差异蛋白进行MS分析，并选择在GA结合蛋白中具有最大丰度比的AKR7A2用于进一步研究（图1C）。纯化的重组AKR7A2蛋白的荧光标记与上述一致（图1D）。此外，CETSA表明GA给药最初增加LX-2细胞中的AKR7A2表达，且与DMSO相比，其结合热稳定性显著提高（图1E）。荧光共定位法观察到GA和IAA-yne在LX-2细胞中竞争性占据的蛋白荧光。核Hoechst、IAA-yne（Click荧光试剂）和AKR7A2蛋白分别显示蓝色、红色和黄色荧光（图1F）。在DMSO处理的细胞中，仅添加具有AKR7A2的荧光二抗的Hoechst。与DMSO组相比，IAA-yne组显示出强烈的红色荧光，表明该蛋白在LX-2细胞中与IAA-yne高度结合。与IAA-yne组相比，GA和IAA-yne竞争性地占据LX-2细胞中的AKR7A2，表现为GA + IAA-yne组的红色荧光强度显著降低，黄色荧光增强。通过分子对接进一步预测GA与AKR7A2的结合位点，模拟分析显示GA与AKR7A2的氨基酸残基ARG-264、LYS-267、CYS-355、GLU-345和GLN-207结合，结合能为-5.47 kJ/mol（图1G）。此外，SPR分析验证了计算机分子对接方法的结果。结果显示GA显著结合AKR7A2，K_d值为21.76 μM（图1H）。这些实验表明GA直接结合AKR7A2。并且在WB实验， GA给药后α-SMA（α-SMA是肝纤维化的标志物之一）水平显著降低，AKR7A2和CYGB（有研究表明，cygb具有预防纤维化和实现纤维化逆转的功能）都在一定程度上增加（图5I）。这些结果进一步证实AKR7A2是GA作用的靶标。

作者通过观察GA对CCl₄诱导的小鼠肝纤维化及激活的肝星状细胞（LX-2细胞）的影响，发现AKR7A2参与了这一过程。其他研究表明AKR7A2是醛/酮还原酶超家族的成员，其依赖于NADP（H）将醛和酮还原成醇，主要存在于组织如肝和肾中，对脂质过氧化产生的醛具有催化活性，因此在防御活性氧以逆转氧化应激中发挥作用。由于GA不仅在活化的HSC中增加AKR7A2的表达，而且在整个肝脏中也增加AKR7A2的表达，因此GA可显著改善肝纤维化。

相关话题

xiahuanihao

第1楼2024/09/10

了解中药材甘草。

0

近期热榜

热门活动

猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐

品牌合作伙伴

研究月球土壤岛津助力郑大用户登Nature顶刊

日立科学仪器

珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）

珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）

日本电子株式会社

赛默飞世尔科技

马尔文帕纳科

上海仪电科仪

梅特勒托利多

布鲁克核磁

举报帖子

点赞用户

好友列表

加载中...

正在为您切换请稍后...